選擇Qubit4.0熒光計(jì)還是NanoDropOne超微量分光光度計(jì)?

這是一個(gè)非常常見且重要的選擇。Qubit 4.0 和 NanoDrop One 是功能互補(bǔ)而非相互替代的儀器。選擇哪一個(gè)（或者更常見的：是否需要兩者）取決于您的實(shí)驗(yàn)對(duì)核酸/蛋白定量準(zhǔn)確性的要求。

簡(jiǎn)單來說：

NanoDrop One：用于快速評(píng)估樣品的濃度和純度（通過A260/A280等比值），但準(zhǔn)確性相對(duì)較低，尤其對(duì)于低濃度樣品。

Qubit 4.0：用于高度精準(zhǔn)、特異地測(cè)量特定類型核酸的濃度，但對(duì)純度信息有限，且通量較低。

下面我將從多個(gè)維度進(jìn)行詳細(xì)對(duì)比，并給出最終建議。

一、根據(jù)您的應(yīng)用場(chǎng)景

1、選擇 NanoDrop One 更適合您，如果：

需要快速評(píng)估純度：您想快速知道樣品中是否有蛋白質(zhì)（A260/A280）、鹽或有機(jī)溶劑（A260/A230）污染。這是NanoDrop優(yōu)勢(shì)。

樣品量充足且濃度較高：例如常規(guī)的質(zhì)粒DNA提取、PCR產(chǎn)物純化后檢測(cè)。

預(yù)算有限或想控制耗材成本：不需要持續(xù)購買昂貴的檢測(cè)試劑。

進(jìn)行定性或半定量分析：例如看看樣品“有沒有"以及“大概多少"。

2、選擇 Qubit 4.0 更適合您，如果：

進(jìn)行高度依賴精確濃度的下游應(yīng)用：

下一代測(cè)序（NGS）：這是必須使用Qubit的領(lǐng)域。NGS文庫定量要求極精確，任何污染物或不準(zhǔn)確定量都會(huì)導(dǎo)致數(shù)據(jù)量不均或測(cè)序失敗。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）：準(zhǔn)確定量模板DNA/cDNA是獲得準(zhǔn)確Ct值的前提。

克隆：需要精確知道插入片段和載體的比例。

樣品珍貴或濃度很低：例如從稀有樣本中提取的DNA、ChIP后的DNA、單細(xì)胞RNA等。Qubit的靈敏度遠(yuǎn)超NanoDrop。

樣品成分復(fù)雜：樣品中可能含有雜質(zhì)，如鹽、蛋白、去污劑、RNA或另一種核酸（如同時(shí)有DNA和RNA），您需要特異性地只測(cè)量其中一種。

二、典型的工作流程

1、首先：NanoDrop快速篩查

提取核酸后，先用NanoDrop測(cè)量。

看濃度：獲得一個(gè)大概的濃度范圍。

看純度：檢查A260/A280和A260/A230比值是否在理想范圍內(nèi)（如1.8-2.0和2.0-2.2）。如果比值異常，說明樣品不純，可能需要重新純化，甚至沒有必要進(jìn)行下一步精確定量。

2、第二步：Qubit精準(zhǔn)定量

對(duì)于通過純度檢查的、要用于關(guān)鍵下游實(shí)驗(yàn)（如NGS、qPCR）的樣品，再用Qubit進(jìn)行最終的精確定量。

確保加到下游反應(yīng)中的每一個(gè)樣品的量都是準(zhǔn)確的。

三、最終建議

如果你的預(yù)算只允許買一臺(tái)，且實(shí)驗(yàn)要求不高：先從 NanoDrop One 開始。它可以滿足大部分教學(xué)、本科實(shí)驗(yàn)和常規(guī)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的初步篩查需求。

如果你從事嚴(yán)格依賴精確定量的研究（如NGS）：Qubit 4.0 是必需品。你甚至可能需要先買Qubit。

理想情況：兩者都配備。先用NanoDrop檢查純度并獲得粗略濃度，再用Qubit對(duì)關(guān)鍵樣品進(jìn)行精確定量。這是目前絕大多數(shù)科研實(shí)驗(yàn)室的黃金標(biāo)準(zhǔn)。

總結(jié)：NanoDrop是“普查工具"，快速且能提供純度信息；Qubit是“精準(zhǔn)工具"，為關(guān)鍵步驟提供可靠數(shù)據(jù)。請(qǐng)根據(jù)您的具體應(yīng)用和預(yù)算做出選擇。